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澳门太阳集团城网址:Elisa试剂盒实验时抗原抗体会有什么反应?点击次数:103 发布时间:2020-09-23

  Elisa试剂盒应用的范围很广,而且正在不断地扩大,原则上Elisa试剂盒可用于检测一切抗原、抗体及半抗原,可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。Elisa试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、稳定性等因素都会影响Elisa检测的结果。
 
  在Elisa试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
 
  ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有较贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。Elisa试剂盒在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。
 
  温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。ELISA试剂盒在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,Elisa试剂盒在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA中一般不予采用。
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